吴聊大鼠。大家好,我是上海欣软的吴文远。
许多研究发现,适当的热应激可以增强机体对外界有害应激的反应,如提高机体对高温和缺血的耐受能力。目前对热应激预处理的研究多集中于对各种应激反应的保护,而对热应激预处理本身对机体尤其是脑和机体功能影响的研究较少,也没有不同热应激预处理方法对脑和机体功能影响的对比研究。本实验通过免疫组织化学和动物行为学的方法,初步探索了不同热应激预处理对小鼠学习记忆和身体状况的影响,为选择合理的热应激预处理方法提供了科学依据。
1对象和方法
1.1实验动物及分组
成年健康昆明系雄性小鼠共120只,体质量(20.0±3.5)g,随机分为4组:正常对照组(NC)、热应激组(HS)、间歇性预处理组(PHP)、连续性预处理组(CHP),每组30只,在热应激后6、12、24h3个时间点每组均取10只进行实验。对照组不施与热处理,在相同时间点进行同步实验。
1.2小鼠热应激预处理模型的制备
将PHP、CHP组小鼠在热应激前24h,置于带鼓风装置的烤箱内(42℃),其内保持适当的湿度,在烤箱内给予热应激预处理。CHP组在烤箱内连续应激45min后取。PHP组在烤箱内应激20min后,到常温环境下恢复10min,再放入烤箱内,反复3次。
1.3小鼠热应激模型的制备
在实验当天,将HS、PHP、CHP组小鼠置于带鼓风装置的烤箱内(42℃),其内保持适当的湿度,给予热应激处理,在烤箱内连续应激120min后取出。
1.4小鼠穿梭实验
热应激结束后6、12、24h分别将小鼠置于CS-2型小白鼠穿梭箱(张家港市生物医学仪器厂)中,使其适应环境5min,以消除其探究反射,然后给以刺激,记录5min内小鼠第1次进入暗室受到电击所需的时间为逃避潜伏期(Escape latency,EL)和累积错误次数(mistake,M),作为学习记忆成绩。
1.5数据处理
穿梭实验、nNOS染色结果用均数±标准差(x±s)表示,实验数据采用SPSS11.5软件包进行单因素方差分析。
2结果
2.1不同处理组各时间点穿梭实验结果比较
与对照组相比,HS组在6h、12h时错误次数明显增多,潜伏期明显缩短(P<0.05);与对照组比较PHP、CHP组在6h时错误次数明显增高,潜伏期明显缩短(P<0.05)。与HS组比较,2种预处理组在6h、12h2个时间点错误次数明显减少,潜伏期明显延长(P<0.05),见表1、2。
3讨论
近年实验结果表明,热应激预处理对于缺血损伤以及高温脑损伤有防护作用,但有关不同HP模型对热应激后动物行为学的影响还鲜有报道。本研究小鼠穿梭实验结果提示,热应激后12h内小鼠学习记忆能力明显下降,在24h后已完全恢复至正常水平。PHP及CHP组在12h时学习记忆能力明显高于HS组,且与对照组小鼠学习记忆能力相当,表明热应激预处理对于热应激后出现的学习记忆能力下降有较好的改善作用。本研究还发现,在接受相同程度的热应激后,HS组和预处理组小鼠在6h时学习记忆能力均明显下降,但2种预处理组小鼠其学习记忆能力在12h时已恢复至正常水平,而HS组小鼠学习记忆能力一直到24h时才恢复。可见,2种热应激预处理方式对热应激脑损伤都起到了明显的减轻作用。