今天介绍一种环状RNA方向二区SCI发文思路,作者研究的是xxx环状RNA通过吸附xxx miRNA促进xxx基因的表达激活了xxx信号通路,从而发挥xxx作用(ceRNA调控机制)。这篇文章发表在Cell Death & Disease上,影响因子:6.3,中科院最新分区:二区,属于OA期刊,需要收取版面费,不在中科院发布的国际预警期刊名单上。
文章题目:Hsa_circ_0110757 upregulates ITGA1 to facilitate temozolomide resistance in glioma by suppressing hsa-miR-1298-5p
分析内容:
1、作者收集相关的TMZ-resistant GBM临床样本组织进行RNA-seq测序找出具有差异的环状RNA(TMZ-resistant vs TMZ-sensitive),作者主要对上调的环状RNA比较感兴趣,然后使用RT-PCR进行验证,发现hsa_circ_0110757 的表达上调最显著,并且在相关细胞系中得到验证。
2、通过相关体外实验证实hsa_circ_0110757会促进TMZ resistance。
3、作者通过miRanda、PITA、 RNAhybrid三个网站预测hsa_circ_0110757下游的miRNA,相关实验证据表明hsa_circ_0110757是通过吸附 hsa-miR-1298-5p发挥作用。
4、通过microRNA、TargetScanVert、miRDB 网站预测hsa-miR-1298-5p下游的靶基因,通过相关筛选最后发现ITGA1是hsa-miR-1298-5p下游调控的靶基因。
5、
hsa_circ_0110757/hsa-miR-1298-5p/ITGA1这样的ceRNA调控机制已经找到了,然后就是探索ITGA1相关的信号通路,最后发现是PI3K/AKT信号通路,相关的作用机制也就得到了解释:hsa_circ_0110757通过吸附hsa-miR-1298-5p促进 ITGA1的表达激活了PI3K/AKT信号通路,从而促进了GBM的TMZ resistance。
6、通过体内实验证实hsa_circ_0110757会促进TMZ resistance。
上面的内容可以归纳在一张图上,如下图:
总结:ceRNA是近几年的研究热点,虽然现在热度是下降了,不过仍然有很多人在做这样的ceRNA基础科研,因为这样的套路比较成熟,论是实验设计还是相关操作可行性都是比较高的。这篇是通过测序筛选出差异的环状RNA,不过临床样本有点少,只有10个(5 vs 5),与那些一两百个样本的测序筛选差远了。当然这个还要考虑课题组的经费问题,不是每个课题组都有这么多经费测序,也不是每一个课题组都能收集到这么多临床样本。但是有些审稿人并不会考虑这些,而是只会让你补充临床样本测序,如果要是遇到这样的审稿人就麻烦了。除了自己收集临床样本测序进行筛选外,还可以利用GEO数据挖掘的方法筛选或者利用GEO数据来验证也行。