堆积柱形图(stacked barplot)展示密码子偏向性的RSCU值

研究密码子偏向性的论文通常都会分析RSCU值,论文中通常会用堆积柱形图来展示RSCU的值,之前在论文里也看到过下面这幅图的形式展示RSCU分析的结果


Rplot.png

之前也有人在公众号留言问过这幅图改如何实现,但是自己当时也不知道。今天看Y叔的公众号文章aplot包:让你画出更复杂的图,解决的主要问题是拼图的时候坐标轴对齐。

看过这篇文章后突然想到展示密码子偏向性RSCU值的这幅图可以借助拼图来实现,下面介绍自己的实现过程。

首先是计算RSCU值

我借助python中的CAI模块实现
https://github.com/Benjamin-Lee/CodonAdaptationIndex
使用pip直接安装

pip install CAI

计算RSCU值

from CAI import RSCU
from Bio import SeqIO
seqs = [rec.seq for rec in SeqIO.parse('codon_usage_example.fasta','fasta')]
rscu = RSCU(seqs)

rscu是一个字典,密码子是键,对应的RSCU是值

写一个简单的脚本获得使用R语言的ggplot2作图的输入文件

from CAI import RSCU
from Bio import SeqIO
c2aa = {
        'TGT':'Cys',
        'UGU':'Cys',
        'TGC':'Cys',
        'UGC':'Cys',
        'GAT':'Asp',
        'GAU':'Asp',
        'GAC':'Asp',
        'GAC':'Asp',
        'TCT':'Ser',
        'UCU':'Ser',
        'TCG':'Ser',
        'UCG':'Ser',
        'TCA':'Ser',
        'UCA':'Ser',
        'TCC':'Ser',
        'UCC':'Ser',
        'AGC':'Ser',
        'AGC':'Ser',
        'AGT':'Ser',
        'AGU':'Ser',
        'CAA':'Gln',
        'CAA':'Gln',
        'CAG':'Gln',
        'CAG':'Gln',
        'ATG':'Met',
        'AUG':'Met',
        'AAC':'Asn',
        'AAC':'Asn',
        'AAT':'Asn',
        'AAU':'Asn',
        'CCT':'Pro',
        'CCU':'Pro',
        'CCG':'Pro',
        'CCG':'Pro',
        'CCA':'Pro',
        'CCA':'Pro',
        'CCC':'Pro',
        'CCC':'Pro',
        'AAG':'Lys',
        'AAG':'Lys',
        'AAA':'Lys',
        'AAA':'Lys',
        'ACC':'Thr',
        'ACC':'Thr',
        'ACA':'Thr',
        'ACA':'Thr',
        'ACG':'Thr',
        'ACG':'Thr',
        'ACT':'Thr',
        'ACU':'Thr',
        'TTT':'Phe',
        'UUU':'Phe',
        'TTC':'Phe',
        'UUC':'Phe',
        'GCA':'Ala',
        'GCA':'Ala',
        'GCC':'Ala',
        'GCC':'Ala',
        'GCG':'Ala',
        'GCG':'Ala',
        'GCT':'Ala',
        'GCU':'Ala',
        'GGT':'Gly',
        'GGU':'Gly',
        'GGG':'Gly',
        'GGG':'Gly',
        'GGA':'Gly',
        'GGA':'Gly',
        'GGC':'Gly',
        'GGC':'Gly',
        'ATC':'Ile',
        'AUC':'Ile',
        'ATA':'Ile',
        'AUA':'Ile',
        'ATT':'Ile',
        'AUU':'Ile',
        'TTA':'Leu',
        'UUA':'Leu',
        'TTG':'Leu',
        'UUG':'Leu',
        'CTC':'Leu',
        'CUC':'Leu',
        'CTT':'Leu',
        'CUU':'Leu',
        'CTG':'Leu',
        'CUG':'Leu',
        'CTA':'Leu',
        'CUA':'Leu',
        'CAT':'HIS',
        'CAU':'HIS',
        'CAC':'HIS',
        'CAC':'HIS',
        'CGA':'Arg',
        'CGA':'Arg',
        'CGC':'Arg',
        'CGC':'Arg',
        'CGG':'Arg',
        'CGG':'Arg',
        'CGT':'Arg',
        'CGU':'Arg',
        'AGG':'Arg',
        'AGG':'Arg',
        'AGA':'Arg',
        'AGA':'Arg',
        'TGG':'Trp',
        'UGG':'Trp',
        'GTA':'Val',
        'GUA':'Val',
        'GTC':'Val',
        'GUC':'Val',
        'GTG':'Val',
        'GUG':'Val',
        'GTT':'Val',
        'GUU':'Val',
        'GAG':'Glu',
        'GAG':'Glu',
        'GAA':'Glu',
        'GAA':'Glu',
        'TAT':'Tyr',
        'UAU':'Tyr',
        'TAC':'Tyr',
        'UAC':'Tyr',
    }


seqs = [rec.seq for rec in SeqIO.parse('codon_usage_example.fasta','fasta')]

rscu = RSCU(seqs)

fw = open('rscu.txt','w')
amino_acid = {}
for aa,bb in rscu.items():
    if c2aa[aa] not in amino_acid:
        amino_acid[c2aa[aa]] = 6
    else:
        amino_acid[c2aa[aa]] -= 0.5
    print(aa,c2aa[aa],round(bb,3),amino_acid[c2aa[aa]])
    fw.write(aa+","+c2aa[aa]+","+str(round(bb,3))+","+str(amino_acid[c2aa[aa]])+"\n")

fw.close()

获得的rscu.txt四列

  • 第一列是密码子
  • 第二列是对应的氨基酸
  • 第三列是RSCU值
  • 第四列是数字,用来填充颜色和控制位置

接下来是ggplot2作图代码

install.packages('aplot')
library(ggplot2)
library(aplot)
df<-read.csv('rscu.txt',header=F,stringsAsFactors = F)
p1<-ggplot(df,aes(fill=as.character(V4),x=V2,y=V3))+
  geom_bar(position = "stack",stat="identity")+
  theme_bw()+scale_y_continuous(expand=c(0,0),
                                limits = c(0,6.2))+
  theme(legend.position = "none")+labs(y="RSCU",x="")
  #geom_text(aes(label=V1),position=position_stack(vjust=0.5))
p1
p2<-ggplot(df,aes(x=V2,y=V4))+
  geom_label(aes(label=V1,fill=as.character(V4)),
             size=2)+
  labs(x="",y="")+ylim(3.4,6.1)+
  theme_minimal()+
  theme(legend.position = "none",
        axis.text = element_blank(),
        axis.ticks = element_blank(),
        panel.grid = element_blank())
p1%>%
  insert_bottom(p2,height = 0.3)

这样就得到了开头提到的图


Rplot.png

还发现了一个R包可以分析密码子偏向性
sscu,具体用法没看,用到再说
还发现了一个网站分析密码子偏向性
http://www.codons.org/Help.html#CU

还看到了一个python模块可以把对应的蛋白质序列弄回核苷酸序列,不知道什么情况下会用到
https://pypi.org/project/codon-harmony/

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