学习小组Day7笔记--善良土豆

学习小组的最后一天,舍不得,意犹未尽

测序

今日学习了啥

到底啥是测序:测序--核酸DNA分子一级结构的测定。

1.怎么区分一二三代测序
2.二代测序大体流程
3.NGS组学都包括哪些分类(粗略)

强烈记录星球推荐的学习链接和资料

1.二代测序原理介绍视频:https://share.weiyun.com/5qojuBY 密码:bxsry4
2.文章《测序的世界》:https://www.jianshu.com/p/101c14c3a1d2 怎么会有这么详细清楚的解释,咋讲的这么通俗易懂呢,优秀,感谢小泽
3.如果还是看不懂,那么请:搜狗微信—搜索“测序原理” ,公众号一般解释的比较清楚。

1.测序的世界

第一代DNA测序技术:桑格尔-双脱氧链终止法是最为经典的一代测序技术,至今仍是测序行业的金标准,目前一代测序在验证序列(就是平时送公司测序返回来自己blast的那些)以及验证基因组组装完整性方面都是金标准。通量低,成本高,一代最长能测1000bp,再多了就要重头开始一遍导致成本高;另外它一次只测一条,也就是所谓的通量低。准确性高达99.999%。
第二代DNA测序技术(next generation sequencing,NGS)-循环阵列合成测序法。
主要平台有:
  1.罗氏454公司的GS FLX sequencer
  2.Illumina solexa genome analyzer
  3.ABI公司的SOLiD sequencer
  二代测序大幅度提高了测序速度,降低了测序成本(下图),保持了高准确性。缺点是读长短,拼接困难,pcr技术增加了测序的错误率。
第三代测序技术以PacBio公司的SMRT和Oxford Nanopore Technologies 的纳米孔单分子测序技术为标志:不需要经过PCR扩增,超长读长,可达二代测序的100倍以上,实现了对每一条DNA分子的单独测序。错误率比二代要高,达到10-15%。

一、二、三代基因测序技术各项参数对比

2.组学

1.基因组学(核酸序列分析)
(1)全基因组测序(WGS)
(2)全外显子组测序(WES)
(3)简化基因组测序(RRGS)
①RAD-Seq
②GBS
③2bRAD
④ddGBS(也就是ddRAD)
作用:
(1)基因组作图(遗传图谱、物理图谱、转录本图谱)
(2)核苷酸序列分析
(3)基因定位
(4)基因功能分析
其它:
以全基因组测序为目标的结构基因组学
以基因功能鉴定为目标的功能基因组学
2.转录组学(基因表达分析)
(1)mRNA-Seq
(2)IncRNA-Seq(长链非编码RNA)
(3)sRNA-Seq(主要是miRNA-Seq)
作用:
(1)获得物种或者组织的转录本信息
(2)得到转录本上基因的相关信息,如基因结构功能等
(3)发现新的基因
(4)基因结构优化
(5)发现可变剪切
(6)发现基因融合
(7)基因表达差异分析

sRNA

3.蛋白质组学
(1)蛋白质组数据处理、蛋白及其修饰鉴定
(2)构建蛋白质数据库、相关软件的开发和应用
(3)蛋白质结构功能预测 (4)蛋白质连锁图
4.代谢组
(1)代谢物指纹分析
(2)代谢轮廓分析

其他相关资料(真好真入门)----由生信星球提供链接:

(1)测序技术原理及常用数据格式简介
(2)DNA 测序技术的发展:第三代测序法
(3)测序发展史:150年的风雨历程
(4) 搜索:【陈巍学基因】视频1 (本视频介绍Illumina测序的化学原理,包括:建库、桥式PCR、边合成边测序、双端测序、Index序列。)Illumina测序化学原理

第七天学习小组最后一导

测序世界
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