胰β细胞移植是目前治疗糖尿病的最有效方法，然而这种疗法需要大量的供体细胞，因此在取材上存在一定难度。另一种有效的治疗方法是利用与胰β细胞同源的胰腺干细胞，将其增殖分化为胰β细胞。间充质干细胞同样具有分化为多种细胞类型的分化潜能[12,13]，且对宿主细胞具有免疫逃避特性[14]，因此本实验选择了小鼠脂肪间充质干细胞做为诱导分化的细胞材料。本实验分别构建了Pdx1（胰十二指肠同源盒基因1）、MafA（V-maf肌肉腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A）、NeuroD1（神经分化因子1）三种基因的慢病毒过表达载体，并分别将其转染入293T细胞，进行慢病毒包装。之后将所得慢病毒颗粒进行浓缩，并分别以单因子侵染、双因子侵染、三因子联合侵染的方式对mADSCs进行定向分化诱导。于诱导后第15天，对不同诱导方式的IPCs进行双硫腙（DTZ）鉴定和特异性标记物（Pdx1, MafA, NeuroD1, Ngn3及Insulin2）检测，并加以高糖刺激，刺激后30-120min检测培养基中含糖量的变化。实验结果显示：（1）慢病毒过表达载体pHBLV-CMV-IRES-ZsGreen-Pdx1、pHBLV-CMV-PGK-RFP-MafA、pHBLV-CMV-PGK-RFP-NeuroD1所含目的片段基因序列与小鼠全基因编码序列完全一致，三种基因慢病毒过表达载体构建成功；（2）诱导分化第15天，三因子联合诱导组所形成的IPCs克隆双硫腙（DTZ）染色呈阳性，并可表达胰岛素生物合成及分泌相关基因；（3）在高糖刺激条件下，三因子联合诱导组糖分解速度、分解量远优于单因子或双因子诱导组。本实验通过慢病毒过表达载体，将三种在血糖调控、胰岛素基因表达、胰β细胞功能维持方面起重要作用的基因转入小鼠脂肪间充质干细胞（mADSCs）内，旨在通过以上三种因子提高诱导mADSCs定向诱导分化为胰岛素分泌细胞（IPCs）的效率。实验发现，三种因子联合应用诱导与二因子或单因子诱导相比，可以更高效率地获得IPCs，并可有效起到抑糖作用。
无标题小鼠脂肪间充质干细胞向胰岛素分泌细胞的诱导分化研究文章
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