产品特点
◎提取 RNA 纯度高,无抑制剂,A260/A280 为 1.8-2.0;
◎产率高,同样的样本量提取的 RNA 更多;
◎可用于唾液样本中 RNA 的提取,提取后的 RNA 可用
于核酸检测使用;
◎不含苯酚和氯仿等有毒溶剂,安全无毒。
产品介绍
BIOG RNASaliva Kit 是用于提取唾液的 RNA 的试剂盒。BIOG RNASaliva Kit 采用了最新的优质进口离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,能高效地分离 RNA。提取得到的 RNA 较其它品牌的同类试剂盒产量更大,纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于 Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。
操作步骤
1. 请自行准备:无水乙醇、无 RNA 酶 1.5 mL 离心管、无 RNA 酶 2.0 mL 离心管。
2. 取出析出液和洗涤液,按以下操作:
a) 洗涤液 A:21mL 加入 9mL 无水乙醇,混匀;42mL 加入 18mL 无水乙醇,混匀。
b) 洗涤液 B:9mL 加入 21mL 无水乙醇,混匀;18mL 加入 42mL 无水乙醇,混匀。
c) 配制好的洗涤液如出现沉淀,可在 37℃溶解,摇匀后使用。
3. 取 300μL 唾液至离心管中,加入 4μL RNACarrier 混合均匀,加入 200μL 裂解液及 20μL 消化液,振荡混匀,56℃水浴 10 分钟。
4. 加入 1mL 无水乙醇,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响 RNA 的提取与后续实验。
5. 将吸附柱放入收集管内,将 760μL 上述溶液转入吸附柱内,静置 2 分钟,12,000 rpm 4℃离心 1 分钟,弃收集管内废液;
6. 将吸附柱放回收集管内,将剩余 760μL 溶液转移至吸附柱内,重复步骤 5。
7. 将吸附柱放回收集管内,加 500μL 洗涤液 A 至吸附柱内,12,000 rpm 4℃离心 1 分钟,弃收集管内废液。
8. 将吸附柱放回收集管内,加 500μL 洗涤液 B 至吸附柱内,静置 2 分钟,12,000 rpm 4℃离心 1 分钟,弃收集管内废液。
9. 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 4℃离心 2 min,离去残留的洗涤液。
10. 取出吸附柱,放入新的 1.5 mL 离心管内,加入 30-60 μL 洗脱液,静置 3 min,12,000 rpm 4℃ 离心 2 min,收集 RNA 溶液。提取的 RNA
即可用于下一步实验或-70℃保存。
注意事项:
1.由于 RNA 容易降解,提取实验所用器具应除去 RNA 酶,实验过程中最好戴一次性洁净手套、口罩,提取的 RNA 溶液可适当加入 RNA
保护因子(货号:51090,一般 50μLRNA 溶液加入 2μL。)
2.裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用
清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。
3. 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象,置于 37℃水浴中溶解即可。