很多人因为网络原因不能使用TCGAbiolinks这个神包下载TCGA的RNA-seq数据，只能通过浏览器访问GDC TCGA的官网进行下载，而下载后得到的是一个个文件夹，对于如何整理成一个表达矩阵也是很麻烦的。

今天给大家介绍一个简单点的方法，使用TCGAbiolinks包整理你通过浏览器官网下载的rna-seq数据。

下载新版TCGA的数据建议使用我之前的教程：TCGA下载和表达矩阵整理：最适合初学者的教程 - 简书 (jianshu.com)，不然会报错。

image.png

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这时候你可以通过之前介绍过的方法得到表达矩阵：新版TCGA数据库表达矩阵整理

但是这个方法对于新手还是不够友好，尤其是根据Json文件匹配数据时，但是TCGA表达量数据又是很常用的，这个操作还是很高频的需求。

前几天学习TCGAbiolinks包时意外发现，即使是手动下载的数据，只要构建合适的路径，也是可以通过GDCprepare()函数进行整理从而简单的得到表达矩阵的！

TCGAbiolinks包下载的表达量数据的文件路径是有规律的，如果你没有特别指明，通常是位于GDCdata\TCGA-COAD\harmonized\Transcriptome_Profiling\Gene_Expression_Quantification这个路径下的。

这个包下载数据就是三板斧操作，query,download,prepare，而且最后GDCprepare()需要的还是GDCquery()得到的对象，因此我们完全可以通过构建一个适合它的路径，让GDC_prepare()帮我们整理成表达矩阵！

比如我上面的各个样本文件夹的路径在我的电脑中是这样的：G:\tcga\GDCdata\TCGA-COAD\harmonized\Transcriptome_Profiling\Gene_Expression_Quantification，我的get_expr.R脚本是放在G:\tcga这个路径下的。

脚本内容如下：一定要注意TCGAbiolinks包的版本！！！

library(TCGAbiolinks)

## =============================================================
## ______  ___  ____   ___                                        
##   ||   |    |      |   | |    o  __  |   o  _         __         
##   ||   |    | ___  |___| |__  | |  | |   | | | | |_/ |__         
##   ||   |___ |____| |   | |__| | |__| |__ | | |_| | \  __|       
## ------------------------------------------------------------
## Query, download & analyze - GDC                  
## Version:2.25.2
## ==============================================================


# 查询这一步是需要的！即使网在栏，这一步应该可以成功的...
query <- GDCquery(project = "TCGA-COAD",
                  data.category = "Transcriptome Profiling",
                  data.type = "Gene Expression Quantification",
                  workflow.type = "STAR - Counts"
                  )
# 下载这一步就不用了，我们是通过官网手动下载的~
# GDCdownload(query, files.per.chunk = 100) #每次下载100个文件
  
# 整理
GDCprepare(query,save = T,save.filename = "example.rdata")

##|===============================================================================|100%   ##                   Completed after 1 m 
##Starting to add information to samples
## => Add clinical information to samples
## => Adding TCGA molecular information from marker papers
## => Information will have prefix 'paper_' 
##coad subtype information from:doi:10.1038/nature11252
##Available assays in SummarizedExperiment : 
##  => unstranded
##  => stranded_first
##  => stranded_second
##  => tpm_unstrand
##  => fpkm_unstrand
##  => fpkm_uq_unstrand
##=> Saving file: example.rdata
##=> File saved

image.png

下次使用直接load即可：

rm(list = ls())
load(file = "example.rdata")

se <- data
se

class: RangedSummarizedExperiment 
dim: 60660 521 
metadata(1): data_release
assays(6): unstranded stranded_first ... fpkm_unstrand fpkm_uq_unstrand
rownames(60660): ENSG00000000003.15 ENSG00000000005.6 ... ENSG00000288674.1 ENSG00000288675.1
rowData names(10): source type ... hgnc_id havana_gene
colnames(521): TCGA-A6-5664-01A-21R-1839-07 TCGA-D5-6530-01A-11R-1723-07 ...
  TCGA-A6-2683-01A-01R-0821-07 TCGA-A6-2683-11A-01R-A32Z-07
colData names(107): barcode patient ... paper_vascular_invasion_present paper_vital_status

这个se就是我们之前介绍过的SummarizedExperiment对象，你可以对它进行各种操作，得到counts矩阵、tpm矩阵、fpkm矩阵都是小事一桩，犹如探囊取物一般简单流畅！ 详情可参考之前的推文。

关于TCGA表达矩阵提取，告诉我，你还有哪里搞不定！？