血液RNA是否可以直接提取得到血液中感染的微生物?

产品特点

◎操作简便快速,20分钟左右可获得理想的RNA;

◎提取RNA纯度高,无抑制剂,1.8<A260/A280≤2.0;

◎产量更高,较国内同类产品高出20%;

◎样本范围广,可用于新鲜、冷冻或陈旧的全血样本。

产品介绍

BIOG专门用于血液RNA的提取纯化。本试剂盒采用独特的裂解液配方,可直接从新鲜、冷冻或陈旧的全血中提取高质量的基因组RNA,也可以直接提取得到血液中感染的微生物或转移的肿瘤细胞RNA, 省去了一般血液RNA提取试剂盒所需的白细胞分离步骤,操作简便快速,只需20分钟左右即可完成血液RNA提取,并且RNA提取得率较高,可在200 μl 全血中提取2-5ug左右基因组RNA。BIOG Blood RNA Isolate Kit采用了最新的优质离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,提取得到的RNA纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR等。

操作步骤 请自行准备无水乙醇、异丙醇和1.5mLRNase-free灭菌离心管

1. 取出洗涤液,按以下操作:

a) 洗涤液A:21mL加入9mL无水乙醇;42mL加入18mL无水乙醇,混匀。

b) 洗涤液B:9mL加入21mL无水乙醇;18mL加入42mL无水乙醇,混匀。

c) 配制好的洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。

2. 取1.5mLRNase-free灭菌离心管,加入200μL血液样本,再加入200μL 裂解液及40μL 消化液,振荡混匀,65℃水浴10 分钟。

3. 加入150μL异丙醇(总体积的25%),混合均匀,如有半透明悬浮物,不影响RNA的提取与后续实验。

4. 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液;

5. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液A至吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。

6. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液B至吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。

7. 按每份样本40μL 取洗脱液(如10份提取样本,即取400μL 洗脱液),放置于灭菌1.5mL离心管,65℃预热。

8. 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 离心2 分钟,离去残留的洗涤液。

9. 取出吸附柱,放入新的1.5mL RNase-free灭菌离心管内,在吸附柱中心加入40 μL预热洗脱液,静置2分钟,12,000 rpm 离心1分钟,收集RNA溶液。提取的RNA即可用于下一步实验或-70℃保存。

BIOG注意事项:

1.裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。

2.如血液量不足200μL,请用0.85% 生理盐水补至200μL;如血液量超出200μL,请使用BIOG中量血液RNA提取试剂盒或BIOG血液富集RNA提取试剂盒。

3. 如果提取的血液为鸟类、禽类的血液,因有核红细胞较多,提取血液量应适当减少,研究者应先进行优化实验,选择合适用量。

4.为防RNA酶污染,实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩,使用处理过的无RNA酶的容器和无RNA酶的超纯水。

5.提取的RNA如暂不使用,应-70℃保存,可适当加入RNA保护因子(货号:51090,一般40μLRNA溶液加入2μL)。

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