FastQC是一个在生物信息学领域广泛使用的工具,用于对高通量测序数据进行质量控制。这是一个Java应用程序,需要一个Java运行环境(JRE)。
FastQC的结果只针对一个测序文件,如果想将多个测序文件的结果整合一块来看,可以尝试用MultiQC软件
MultiQC是一种基于Python的工具,用于整合和查看多种类型高通量测序数据的质量控制结果。
安装
1. 安装Java Runtime Environment (JRE)和 Java Development Kit (JDK)
1.1. JRE和JDK
- Java有多种不同的实现;Open JDK和Oracle Java是Java的两个主要实现,它们之间几乎没有区别。
- Java Runtime Environment (JRE): 由Java虚拟机JVM,类和二进制文件组成,提供环境让我们能够运行Java程序。
- Java Development Kit (JDK):包含构建Java应用程序所需的JRE以及开发/调试工具和库,有些java程序运行的时候需要调用。
1.2. 安装
1.2.1. apt安装方式(有sudo权限)
- 需要sudo权限,可以在自己的虚拟机或服务器试
- 默认的Ubuntu 20.04软件源包含两个OpenJDK软件包:Java Runtime Environment JRE和Java Development Kit JDK。
- Ubuntu Server 20.04软件源提供的jre及其安装代码:
sudo apt install openjdk-11-jre-headless # version 11.0.20.1+1-0ubuntu1~20.04, or sudo apt install default-jre # version 2:1.11-72 sudo apt install openjdk-16-jre-headless # version 16.0.1+9-1~20.04 sudo apt install openjdk-17-jre-headless # version 17.0.8.1+1~us1-0ubuntu1~20.04 sudo apt install openjdk-8-jre-headless # version 8u382-ga-1~20.04.1 sudo apt install openjdk-13-jre-headless # version 13.0.7+5-0ubuntu1~20.04
在Ubuntu安装JDK和JRE:
- 安装
sudo apt-get update sudo apt install openjdk-11-jre-headless -y sudo apt install default-jdk -y
- 测试是否安装成功
java -version javac -version
(安装成功可以不看这条)我在运行
sudo apt install default-jdk -y
时出现以下报错且安装失败:法一
参考文章https://blog.csdn.net/weixin_44120025/article/details/120934224
cd /etc/apt/apt.conf.d sudo chmod 777 proxy.conf #如果显示找不到该文件,就换种方法 sudo gedit proxy.conf #弹出proxy.conf文件,删除里面的http那两行,保存关闭 sudo chmod 444 proxy.conf
法二(换源)
参考文章https://blog.csdn.net/Leslie___Cheung/article/details/120885228
sudo cp /etc/apt/sources.list /etc/apt/sources.list.bak #备份原文件 sudo chmod 777 /etc/apt/sources.list #更改文件权限使其可编辑 sudo gedit /etc/apt/sources.list #打开文件进行编辑 #删除原来的文件内容,复制下面的内容到其中并保持 deb https://mirrors.tuna.tsinghua.edu.cn/ubuntu/ bionic main restricted universe multiverse deb-src https://mirrors.tuna.tsinghua.edu.cn/ubuntu/ bionic main restricted universe multiverse deb https://mirrors.tuna.tsinghua.edu.cn/ubuntu/ bionic-updates main restricted universe multiverse deb-src https://mirrors.tuna.tsinghua.edu.cn/ubuntu/ bionic-updates main restricted universe multiverse deb https://mirrors.tuna.tsinghua.edu.cn/ubuntu/ bionic-backports main restricted universe multiverse deb-src https://mirrors.tuna.tsinghua.edu.cn/ubuntu/ bionic-backports main restricted universe multiverse deb https://mirrors.tuna.tsinghua.edu.cn/ubuntu/ bionic-security main restricted universe multiverse deb-src https://mirrors.tuna.tsinghua.edu.cn/ubuntu/ bionic-security main restricted universe multiverse deb https://mirrors.tuna.tsinghua.edu.cn/ubuntu/ bionic-proposed main restricted universe multiverse deb-src https://mirrors.tuna.tsinghua.edu.cn/ubuntu/ bionic-proposed main restricted universe multiverse
1.2.2. 预编译安装方式(没有sudo权限)
- 有些java软件要求特殊的jdk版本,需自行下载配置
- Oracle下载页面:https://www.oracle.com/java/technologies/downloads/
- 参考文章:https://segmentfault.com/a/1190000038587476
2.下载安装FastQC
- 软件主页:https://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/fastqc/
- 下载页面:https://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/download.html#fastqc
在Linux上安装FastQC具体过程如下:
- 创建一个名为“Biosofts”的文件夹
mkdir Biosofts
- 进入“Biosofts”文件夹
cd ~/Biosofts
- 从官方下载网站下载FastQC的最新版本
wget https://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/fastqc/fastqc_v0.12.1.zip
- 解压缩下载的文件并检测是否解压成功
unzip fastqc_v0.12.1.zip -d ~/Biosofts ~/Biosofts/FastQC/fastqc -h
- 将FastQC的路径添加到系统环境变量中并使其生效
echo 'export PATH=~/Biosofts/FastQC:$PATH'>>~/.bashrc source ~/.bashrc
- 通过输入
fastqc -h
来检查FastQC是否安装成功。如果出现帮助界面,则说明安装成功。fastqc -h
下面是我上机实操的运行画面
3.下载安装MultiQC
- multiqc官网:https://multiqc.info/
- multiqc软件包:https://github.com/ewels/MultiQC
- channel也可以用中科大的: https://mirrors.ustc.edu.cn/anaconda/cloud/bioconda/
- 除了conda,大家也可以试试pip安装
- 如果是conda安装,既可以在python3也可以在python2环境安装。
在Linux上使用Anaconda安装multiqc的过程如下:
首先,确保已经安装了Anaconda。如果没有安装Anaconda,请参考我之前文章:Ubuntu中Anaconda的安装与使用
-
打开终端,通过以下命令创建一个新的Python环境(我创建的名为"myenv"):
conda create -n myenv python=3.7
这将创建一个新的Python 3.7环境,你也可以根据需要选择其他Python版本。
-
激活新创建的环境:
conda activate myenv
-
接下来,使用以下命令安装multiqc和其依赖项:
conda install -c bioconda multiqc #或者pip安装 pip install --user multiqc -i https://pypi.mirrors.ustc.edu.cn/simple/
这将从bioconda渠道中安装multiqc及其相关依赖项。bioconda是一个专门用于生物信息学软件的conda渠道。
安装完成后,你就可以在该环境中使用multiqc了。
在创建和激活新的环境后,你可以使用conda list
命令来查看已安装的软件包列表,以确保multiqc和其依赖项已成功安装。
运行画面
使用
在Linux中,fastqc和multiqc是两个用于质量控制和报告生成的常用工具。
1. FastQC:
- FastQC是一个用于快速检查测序数据质量的工具。
- 使用FastQC可以生成一个HTML格式的报告,其中包含有关测序数据的各种质量指标和图表。
- FastQC支持FASTQ格式的测序数据,可以分析单个文件或多个文件。
- 命令:
fastqc input.fastq
或fastqc input1.fastq input2.fastq
。 -
实例
2. MultiQC:
- MultiQC是一个用于整合多个质量控制结果的工具。
- 使用MultiQC可以将多个FastQC或其他质量控制工具生成的报告合并为一个整体的报告。
- MultiQC支持多种类型的报告,包括FastQC、Trimmomatic、Bowtie、BWA等。
- 命令:
multiqc .
或multiqc /path/to/folder
. -
实例
以上命令中,input.fastq
是待分析的FASTQ格式文件,input1.fastq
和input2.fastq
是多个文件的示例输入。MultiQC的示例命令中,.
表示当前目录,/path/to/folder
是包含质量控制报告的文件夹路径。
3.获取测序数据
我后续会更新附带详细图片的获取过程
使用NCBI的网页界面搜索、浏览和下载数据步骤:
访问NCBI网站:打开浏览器,访问NCBI,网址为 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/ 。
搜索数据:在NCBI的主页或相应数据库的页面上,使用搜索栏输入你想要查找的关键词、Accession号、物种名称等,然后点击搜索按钮。
过滤结果:在搜索结果页面,你可以使用筛选器、限定条件和其他选项来缩小结果范围,以便找到你需要的数据。
选择数据:在搜索结果中找到你需要的数据,点击相关条目查看详细信息。
下载数据:在数据的详细信息页面,通常会有一个“Download”或类似的按钮或链接,点击它将会弹出下载选项。选择你想要的文件格式(如FASTA、FASTQ等)以及下载位置,然后开始下载。
这些步骤是笼统的,具体的步骤和界面可能因NCBI网站的更新而有所变化。可以多看看相关教学内容。
上述实机操作画面因为使用的不同方式与账号登录的Linux(带图形界面的是我自己电脑上操作,没有图形界面的是通过老师提供的账号与服务器远程操作的),界面图片和账号已及环境名称会有差别,但整体操作过程是相同的。