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@冻春卷 奥奥，知道了，谢谢你，我们的质粒不带GFP，可能转个会方便一些😊

CRISPR-Cas9基因敲除sgRNA设计

大佬说，我只说一次，你自己要记住以最火热的p53为例 Step 1 先找p53基因序列 1. NCBI--输入p53并选择物种human：tumor protein p53 ...

冻春卷

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@冻春卷 想请教一下你用流式筛选阳性细胞是带什么标签吗还是？这个是普通的流式就可以做还是说对流式有什么特殊要求呀😊

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大佬说，我只说一次，你自己要记住以最火热的p53为例 Step 1 先找p53基因序列 1. NCBI--输入p53并选择物种human：tumor protein p53 ...

冻春卷

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@冻春卷 嘿嘿，我们实验室乃至我们学院目前没有挑单克隆的仪器，所以都是用96孔板梯度稀释来挑单克隆，但是存在一个问题就是有的孔里的细胞会死掉，有的孔里的单克隆不止一个，只有极个别的孔里是单克隆，有时候一验证发现是假阳性，很崩溃，这个方法真的是耗时又费力☹

CRISPR-Cas9基因敲除sgRNA设计

大佬说，我只说一次，你自己要记住以最火热的p53为例 Step 1 先找p53基因序列 1. NCBI--输入p53并选择物种human：tumor protein p53 ...

冻春卷

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@科研搬砖小白菜 我试过一次，先在蛋白水平进行了检测，效率不太理想，无效的靶点会掩盖掉有效的靶点导致KO成了knock down

CRISPR-Cas9基因敲除sgRNA设计

大佬说，我只说一次，你自己要记住以最火热的p53为例 Step 1 先找p53基因序列 1. NCBI--输入p53并选择物种human：tumor protein p53 ...

冻春卷

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@冻春卷 好的，谢谢你，有不懂的了再请教你😘

CRISPR-Cas9基因敲除sgRNA设计

大佬说，我只说一次，你自己要记住以最火热的p53为例 Step 1 先找p53基因序列 1. NCBI--输入p53并选择物种human：tumor protein p53 ...

冻春卷

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@冻春卷 解释的很专业，感觉自己太弱智了，那我可以用混合pool同时去瞬转同一皿293T让其包装产生病毒，是这个意思吗

CRISPR-Cas9基因敲除sgRNA设计

大佬说，我只说一次，你自己要记住以最火热的p53为例 Step 1 先找p53基因序列 1. NCBI--输入p53并选择物种human：tumor protein p53 ...

冻春卷

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谢谢，我还想请教一个问题，我可以将同一基因合成的不同靶点序列一起连到Cas9载体上吗，然后再去包装病毒感染目的细胞😂

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大佬说，我只说一次，你自己要记住以最火热的p53为例 Step 1 先找p53基因序列 1. NCBI--输入p53并选择物种human：tumor protein p53 ...

冻春卷

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想请教一下所有亚型共有区域那张图在SnapGene中是打开就是这样的吗？我要研究的基因怎么打开在Map里和这个不太一样呀，都不知道怎么分析这些亚型的共有外显子😂

CRISPR-Cas9基因敲除sgRNA设计

大佬说，我只说一次，你自己要记住以最火热的p53为例 Step 1 先找p53基因序列 1. NCBI--输入p53并选择物种human：tumor protein p53 ...

冻春卷

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