对于经常做分子生物学实验的研究者来说，能否从生物材料中获得符合质量要求的DNA，直接关系到下游实验的成败。在众多的生物材料中，各种动物组织是我们经常研究的，它对于很多生命机...
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磁珠法组织DNA提取试剂的选择
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磁珠法血液DNA提取试剂的选择
随着大型医疗机构和检测机构样本量的增多，如何高效快速地进行核酸检测成为研究者关注的重点。目前，医疗机构以及检测机构几乎都会首选血液样本作为检测标本。血液DNA提取方法主要有...
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细胞DNA提取试剂的选择从细胞或组织中提取核酸进行分子生物学研究或基因检测已经成为现代医学诊断以及科学研究的一种重要手段。原理不必多说，做过相关实验的小伙伴应该都知道，那就是将细胞膜破裂，变性膜蛋...
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粪便DNA提取试剂的选择
随着肠道菌群宏基因组研究的兴起，研究者通过提取肠道全部微生物基因组DNA，构建宏基因组文库，对菌群多样性和功能活性、种群结构、协作关系、与肠道间关系、进化关系进行研究，可以...
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拭子RNA提取试剂的选择
目前，主流的RNA提取方法有Trizol法、离心柱法和磁珠法。其中，Trizol法与离心柱法相比，提取效果相当，但因其对操作者带来的毒性，现在越来越被弃用。磁珠法可以针对大...
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苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并含DNA 的水相，利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物质，可用玻璃漫漫绕成一团，取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 .但缺点是费时费力，苯酚和氯仿还有一定毒性，我见过的实验室很少有用这种方法的。试剂盒经典的是离心柱(BIODAI)就是把硅胶膜固定在离心管中，类似于超滤膜，用离心力或者负压让液体通过硅胶膜，核酸就留在膜上。在经过洗涤、洗脱的步骤得到核酸。这种方法的优点是操作简单、时间短，现在也能达到很高的质量
核酸提取经验总结
一、核酸 核苷酸单体聚合而成的生物大分子，是生物细胞最基本和最重要的成分。一般认为，生物进化即始于核酸，因为在所有生命物质中只有核酸能够自我复制。今天已知核酸是生物遗传信息的...
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37℃15min是一个逆转录的过程，而85℃5s是灭活逆转录酶，我们实验用的BIODAI逆转录实验修要50℃逆转录反应45分钟，再85℃ 5分钟灭活逆转录酶，如果需要获取的目标cDNA长度大于5kb，逆转录时间就需要相应延长到60分钟。
普通PCR、原位PCR、反向PCR和反转录PCR的 基本原理和操作步骤（三）
反向PCR 普通PCR、原位PCR、反向PCR和反转录PCR的 基本原理和操作步骤（三） 反向PCR(reverse PCR)是用反向的互补引物来扩增两引物以外的未知序列的片...
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逆转录过程的揭示是分子生物学研究中的重大发现，是对中心法则的重要修正和补充。人们通过体外模拟该过程，以样本中提取的mRNA为模板，我们实验室用的BIOG Super Reverse Transcriptase效果尤为明显，在逆转录酶（BIOG Super Reverse Transcriptase）的作用下，合成出互补的cDNA，构建cDNA文库，并从中筛选特异的目的基因。该方法已成为基因工程技术中最常用的获得目的基因的策略之一。
反转录
rtPCR的关键步骤： 反转录：将RNA反转录合成 cDNA模板 变性：让cDNA充分打开 退火：让引物能结合到模板DNA上 延伸：让 DNA 聚合酶（Taq 酶）开...
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MicroRNA确实不易提取，不过最近我们实验室新购入了一款biog提取游离RNA的试剂盒，提取纯度比较高，而且操作简单快捷，只要半个小时。
microRNA调控m6A RNA甲基化文献解读
m6A RNA Methylation Is Regulated by MicroRNAsandPromotes Reprogramming to Pluripotency ...
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DNA降解无非两个原因：
1.细胞内DNA酶作用于gDNA，你的材料在放入提取液前没有在细胞破碎的情况下放久吧？
2.机械力作用：有很剧烈的长时间涡旋吗？或者之类的。但一般也不会有事。
我们实验室一般使用BIOG DNA Blood Isolate Kit提取全血样本中的DNA,然后Qubit测提取到的DNA浓度CTAB法--DNA提取
实验步骤 1.称取0.1g左右的植物组织，放入2ml离心管，加入600ul的DNA提取缓冲液（Buffer ①+Buffer②+Buffer③+Na2HSO3）。2.研磨彻底...
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听我师姐说他们用BIOG CFDNA EASY KIT离心技术提取样本血清中的microRNA,然后用Qubit 测浓度,我认为楼主如果觉得提取到的microRN浓度不高可以用3倍体积的无水乙醇、0.1体积的NaAC和1ul 15mg/ml的glycogen沉淀进行浓缩,或者可以用真空浓缩仪进行浓缩
microRNA与血管通透性转移研究套路
Cancer-secretedmiR-105destroysvascularendothelialbarrierstopromotemetastasis，if=27.407C...