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    CRISPR-Cas9基因编辑5--不可或缺的sgRNA活性预实验

    前言: 大家都知道CRISPR-Cas9有脱靶效应,并且每个sgRNA的效率都不一样的,因此在做正式实验之前,我们要验证sgRNA的效率,之后优中选优。还是那句话,同样的目的...

  • 师姐你好,我在做病毒基因敲除,设计了三对gRNA,分别做质粒的单转染和双转染,细胞是293T,转染效率ok,提病毒DNA,设计引物鉴定,没敲掉的应该全长500bp,双质粒转染敲掉的应该全长300-400bp。这种情况下我是直接PCR后跑胶,但是全部孔只有500bp处有条带,没有敲掉的。我需要做T7E1错配实验来验证吗,条带大小有差异可以只PCR跑胶吗?现在是不确定我没敲掉还是我的验证方法有问题。盼复!

    CRISPR-Cas9基因编辑5--不可或缺的sgRNA活性预实验

    前言: 大家都知道CRISPR-Cas9有脱靶效应,并且每个sgRNA的效率都不一样的,因此在做正式实验之前,我们要验证sgRNA的效率,之后优中选优。还是那句话,同样的目的...