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  • 您好!很冒昧打扰您!想和您请教下做sgRNA体外切割活性的时候,切割后的条带显示还是DNA+sgRNA的两个位置,并且sgRNA那个条带是十分浅的,感觉DNA和sgRNA并没有发挥相应的作用,各跑各的,想请教下这种是存在什么问题呢,应该怎么解决呢?

    CRISPR-Cas9基因编辑不只是剪开DNA这么简单

    前言 我只是搬运工,这部分内容我参考的内容有:CRISPR Editing is All About DNA Repair MechanismsCRISPR-guideMME...

  • 您好!很冒昧打扰您!想和您请教下我sgRNA体外转录的条带是很亮的一块,然后用没纯化的sgRNA直接进行体外切割活性检测,不仅切不出来那条带,只在最下面有个拖带,拖带相加也不等于原本的条带,而且连原本DNA模板应该有的带都不见了,想请教下这是什么原因?如果您能回我的话,我将感激不尽!谢谢!

    sgRNA切割活性问题探讨

    基因编辑需要通过网站设计合适的sgRNA,确认切割效率之后既可以进行细胞实验或者活体注射,下面讲述几点关于sgRNA活性检测中遇到的问题及思考。 虽然体外的剪切活性并不能模拟...

  • 您好!很冒昧打扰您!想和您请教下我sgRNA体外转录的条带是很亮的一块,然后用没纯化的sgRNA直接进行体外切割活性检测,不仅切不出来那条带,只在最下面有个拖带,拖带相加也不等于原本的条带,而且连原本DNA模板应该有的带都不见了,想请教下这是什么原因?如果您能回我的话,我将感激不尽!谢谢!

    CRISPR-Cas9基因编辑5--不可或缺的sgRNA活性预实验

    前言: 大家都知道CRISPR-Cas9有脱靶效应,并且每个sgRNA的效率都不一样的,因此在做正式实验之前,我们要验证sgRNA的效率,之后优中选优。还是那句话,同样的目的...