R语言之书:“每年大约有四个新版本的R,用于解决函数、兼容性问题和错误修复。最好保持最新版本。” 首先将R与RStudio更新至最新版本(2020.6.4我R用的4.0.0,...
泛癌的基因表达量一般可以用TCGA和GTEx实现,但是肿瘤细胞系一般用CCLE临床生信之家[https://www.aclbi.com/static/index.html#/...
CCLE是肿瘤细胞基因表达的百科全书,之前写CCLE:求任意基因的相关性[https://www.jianshu.com/p/59f979ab09ee]稍微介绍过其用法。今天...
你好啊,用的载体是v2,酶切的酶是bsmbi v2,neb的,要求的酶切温度是55度,我是需要把你这里的37改到55吗?目前试了各种都出不来克隆,太扎心了
Western Blot(WB),蛋白免疫印迹法,一句话,定性、定量检测蛋白表达的一种经典、有效的技术方法。 将电泳分离的细胞或组织蛋白转移到PVDF膜上,用特定抗体结合蛋白...
前期文章 一个超简单的转录组项目全过程--iMac+RNA-Seq(一)一个超简单的转录组项目全过程--iMac+RNA-Seq(二)QC 3 Alignment 有很多软件...
@冻春卷 谢谢春卷师姐呀,还有一个问题想请教。我想过可不可以利用GG assembly同时将设计的三条sgRNA连到一个vector上,也看到有文献是这样的,不知道你们实验室有没有尝试过呢?
CRISPR-Cas9基因编辑3--sgRNA-Cas9质粒构建简介和前期文章 我对之前的所有教程进行了再次详细的总结CRISPR-Cas9基因编辑之背景介绍及gRNA设计(上)[https://www.jianshu.com/p/e5c...
春卷菌,我又来了,今天试了下消化后稀释到10^3个/ML,然后取100ul加到20ml后取200ul至96孔板,2h后去看发现每个孔里面哪只1个😭,如果是不带荧光的细胞,方法三操作性怎么样呢?太难了这操作
我觉得T4 PNK最好留着。T4 PNK也便宜。如果按合成引物的方法,没有额外加磷酸化修饰,5‘端是-OH,不好连,效率不高。如果用T4 PNK 5’的OH变成磷酸基团,磷酸二酯容易形成
春卷师姐您好呀,想问问您有没有在质粒构建的过程当中选择过golden gate assembly的方法,我因为选择了IIS型限制性内切酶,还没开始做,有一点点慌。
CRISPR-Cas9基因编辑3--sgRNA-Cas9质粒构建简介和前期文章 我对之前的所有教程进行了再次详细的总结CRISPR-Cas9基因编辑之背景介绍及gRNA设计(上)[https://www.jianshu.com/p/e5c...
我们用两篇文章的篇幅大概讲了一遍质粒的骨架及其各个要素的介绍:解剖式学习一个质粒结构--update[https://www.jianshu.com/p/e6c5852f60...
蛋白受体选择 UniProt数据库: https://www.uniprot.org/[https://www.uniprot.org/] 这里以CEACAM6为例 优先选择...
上一周我在介绍转座子系统的时候有说到慢病毒的坏话,但是说到敲减过表达,慢病毒必须要有排面。且慢病毒的受众广泛到甚至可以感染神经元等高度分化不再分裂的细胞。不知道大家有没有疑惑...
版权所有:http://epigenie.com/products/enchip-kit/ Catalog No.53125. 什么是enChIP: Chromatin Im...
[注] 本指南翻译自 addgene,如有不妥之处,请指出以改进,谢谢!另:如果希望转载本文,请注明出处,谢谢 CRISPR/Cas9总概 成簇规律间隔的短回文重复序列(Cl...
1. 裂解液成分了解: (1)大多有效成分都是去垢剂,那么去垢剂是什么呢? 去垢剂功能的关键是具有两亲结构。所有的去垢剂都具有亲水“头部”区域和疏水“尾部”区域这一特征,...
ChIP的一般流程: 甲醛处理细胞—收集细胞,超声破碎—加入目的蛋白的抗体,与靶蛋白-DNA复合物相互结合—加入ProteinA,结合抗体-靶蛋白-DNA复合物,并沉淀—对沉...